很多細(xì)胞培育的使用者們都聽過二氧化碳培養(yǎng)箱,知道二氧化碳培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的有利工具,但是對(duì)其原理和高效使用的方法都不甚了解,下面我們就來好好了解一下二氧化碳培養(yǎng)箱。
1.什么是二氧化碳培養(yǎng)箱?
二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境,培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對(duì)飽和濕度(95%),來對(duì)細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置,是細(xì)胞、組織、細(xì)菌培養(yǎng)的一種先進(jìn)儀器,是開展免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、遺傳學(xué)及生物工程所必須的關(guān)鍵設(shè)備。
2.為什么使用二氧化碳培養(yǎng)箱?
由于空氣中的二氧化碳濃度很低,如細(xì)胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)液中的 HCO3-會(huì)被耗盡,這樣會(huì)影響細(xì)胞的正常生長。所以大部分動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),還是需要二氧化碳培養(yǎng)箱。二氧化碳培養(yǎng)箱通過對(duì)周圍環(huán)境條件的控制制造出一個(gè)能使細(xì)胞組織更好地生長的環(huán)境,終會(huì)形成一個(gè)穩(wěn)定的條件:例如問帝國的二氧化碳水平,穩(wěn)定的溫度,恒定的酸堿度。簡(jiǎn)而言之,二氧化碳培養(yǎng)箱使用方便并且穩(wěn)定可靠。
3.如何實(shí)現(xiàn)二氧化碳濃度的精準(zhǔn)控制?
CO2濃度探測(cè)可通過兩種控制系統(tǒng)——紅外傳感器(IR)或熱傳導(dǎo)傳感器(TC)進(jìn)行測(cè)量。當(dāng)二氧化碳培養(yǎng)箱的門被打開時(shí),CO2從箱體內(nèi)漏出,此時(shí)傳感器就會(huì)探測(cè)到CO2濃度的降低,并做出及時(shí)的反應(yīng),重新注入CO2使其恢復(fù)到原先預(yù)設(shè)的水平。
熱傳導(dǎo)傳感器(TC)監(jiān)控CO2濃度的工作原理是通過測(cè)量?jī)蓚€(gè)電熱調(diào)節(jié)器(一個(gè)調(diào)節(jié)器暴露于箱體環(huán)境內(nèi),另一個(gè)則是封閉的)之間的電阻變化來實(shí)現(xiàn)的。箱內(nèi)CO2濃度的變化會(huì)改變兩個(gè)電熱調(diào)節(jié)器間的電阻,從而促使傳感器產(chǎn)生反應(yīng)以達(dá)到調(diào)節(jié)CO2水平的作用。TC控制系統(tǒng)的一個(gè)缺點(diǎn)就是箱內(nèi)溫度和相對(duì)濕度的改變會(huì)影響傳感器的精確度。當(dāng)箱門被頻繁打開時(shí),不僅CO2濃度,溫度和相對(duì)濕度也會(huì)發(fā)生很大的波動(dòng),因而影響了TC傳感器的精度。當(dāng)需要精確的培養(yǎng)條件和頻繁開啟培養(yǎng)箱門時(shí),此控制系統(tǒng)就顯得不太適用了。
紅外傳感器(IR)作為另一個(gè)可選擇的控制系統(tǒng)比TC系統(tǒng)具備更精確的CO2控制能力,它是通過一個(gè)光學(xué)傳感器來檢測(cè)CO2水平的。IR系統(tǒng)包括一個(gè)紅外發(fā)射器和一個(gè)傳感器,當(dāng)箱體內(nèi)的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后,傳感器就可以檢測(cè)出紅外線的減少量,而被吸收紅外線的量正好對(duì)應(yīng)于箱體內(nèi)CO2的水平,從而可以得出箱體內(nèi)CO2的濃度。因?yàn)?/font>IR系統(tǒng)不會(huì)因溫度和相對(duì)濕度的改變而受到影響,所以它比TC系統(tǒng)更精確,特別適用于需要頻繁開啟培養(yǎng)箱門的細(xì)胞培養(yǎng)。
4.如何實(shí)現(xiàn)二氧化碳箱內(nèi)溫度的精準(zhǔn)控制?
保持培養(yǎng)箱內(nèi)恒定的溫度是維持細(xì)胞健康生長的重要因素。當(dāng)選購二氧化碳培養(yǎng)箱時(shí),有兩種類型的加熱結(jié)構(gòu)可供選擇:氣套式加熱和水套式加熱。雖然這兩種加熱系統(tǒng)都是精確和可靠的,但是它們都有著各自的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。
水套式培養(yǎng)箱是通過一個(gè)獨(dú)立的熱水間隔間包圍內(nèi)部的箱體來維持溫度恒定的。熱水通過自然對(duì)流在箱體內(nèi)循環(huán)流動(dòng),熱量通過輻射傳遞到箱體內(nèi)部從而保持了溫度的恒定。*的水套式設(shè)計(jì)有其優(yōu)點(diǎn):水是一種很好的絕熱物質(zhì),當(dāng)遇到斷電的時(shí)候,水套式系統(tǒng)就能更可靠地長久保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性(維持溫度恒定的時(shí)間是氣套式系統(tǒng)的4-5倍)。如果您的實(shí)驗(yàn)環(huán)境不太穩(wěn)定(如有用電限制,或者經(jīng)常停電)并需要保持長時(shí)間穩(wěn)定的培養(yǎng)條件,此時(shí),水套式設(shè)計(jì)的二氧化碳培養(yǎng)箱就是您較好的選擇。
氣套式加熱系統(tǒng)是通過箱體內(nèi)的加熱器直接對(duì)箱內(nèi)氣體進(jìn)行加熱的。氣套式設(shè)計(jì)在箱門頻繁開關(guān)引起的溫度經(jīng)常性改變的情況下能夠迅速恢復(fù)箱體內(nèi)的溫度穩(wěn)定。因此,氣套式與水套式相比,具有加熱快,溫度的恢復(fù)比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點(diǎn),特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關(guān)的培養(yǎng)。對(duì)于使用者來說氣套式設(shè)計(jì)比水套式更簡(jiǎn)單化(水套式需要對(duì)水箱進(jìn)行加水、清空和清洗,并要經(jīng)常監(jiān)控水箱運(yùn)作的情況)。在購買氣套式培養(yǎng)箱時(shí),要注意的是:為了不影響培養(yǎng),培養(yǎng)箱還應(yīng)該有一個(gè)風(fēng)扇以保證箱內(nèi)空氣的流通和循環(huán),此裝置還有助于箱內(nèi)溫度、CO2和相對(duì)濕度的迅速恢復(fù)。
5.使用二氧化碳培養(yǎng)箱的注意事項(xiàng)?
1、二氧化碳培養(yǎng)箱未注水前不能打開電源開關(guān),否則會(huì)損壞加熱元件。
2、培養(yǎng)箱運(yùn)行數(shù)月后,水箱內(nèi)的水因揮發(fā)可能減少,當(dāng)?shù)退恢甘緹袅習(xí)r應(yīng)補(bǔ)充加水。先打開溢水管,用漏斗接橡膠管從注水孔補(bǔ)充加水使低水位指示燈熄滅,再計(jì)量補(bǔ)充加水,然后堵塞溢水孔。
3、二氧化碳培養(yǎng)箱可以做高精度恒溫培養(yǎng)箱使用,這時(shí)須關(guān)閉CO2控制系統(tǒng)。
4、因?yàn)?/font>CO2傳感器是在飽和濕度下校正的,因此加濕盤必須時(shí)刻裝有滅菌水。
5、當(dāng)顯示溫度超過置定溫度1℃時(shí),超溫報(bào)警指示燈亮,并發(fā)出尖銳報(bào)警聲,這時(shí)應(yīng)關(guān)閉電源30分鐘;若再打開電源(溫控)開關(guān)仍然超溫,則應(yīng)關(guān)閉電源并報(bào)維修人員。
6、鋼瓶壓力低于0.2MPa時(shí)應(yīng)更換鋼瓶。
7、盡量減少打開玻璃門的時(shí)間。
8、如果二氧化碳培養(yǎng)箱長時(shí)間不用,關(guān)閉前必須清除工作室內(nèi)水分,打開玻璃門通風(fēng)24小時(shí)后再關(guān)閉。
9、清潔二氧化碳培養(yǎng)箱工作室時(shí),不要碰撞傳感器和攪拌電機(jī)風(fēng)輪等部件。
10、拆裝工作室內(nèi)支架護(hù)罩,必須使用隨機(jī)扳手,不得過度用力。
11、搬運(yùn)培養(yǎng)箱前必須排除箱體內(nèi)的水。排水時(shí),將橡膠管緊套在出水孔上,使管口低于儀器,輕輕吸一口,放下水管,水即虹吸流出。
12、搬運(yùn)二氧化碳培養(yǎng)箱前應(yīng)拿出工作室內(nèi)的擱板和加濕盤,防止碰撞損壞玻璃門。
13、搬運(yùn)培養(yǎng)箱時(shí)不能倒置,同時(shí)一定不要抬箱門,以免門變形。
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